原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，三维细胞培养，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，三维细胞培养哪家好，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
污染途径 污染物，特别是微生物常通过下列途径进入培养体系，造成污染
1、空气：空气是微生物及尘埃颗粒传播的主要途径。空气流动性大，如果培养操作场地于外界隔离不严格或消毒不充分，外界不洁空气很容易进入造成污染。因此，培养设施不能设在通风场所。无菌操作应在净化台内进行，工作时要带口罩，以免因讲话、咳嗽等使外界污染进入操作面，造成污染。
2、器材：各种培养器皿、器械消毒不彻底和洗刷不干净导致污染，另外需要对培养箱进行定期消毒，防止形成污染
3、操作：实验操作无菌观念不强，技术不熟练，三维细胞培养厂家，使用污染的器皿或封瓶不严等，都可以造成污染。培养两种细胞以上时，操作不规范，交叉使用吸管或培养液、瓶等有可能导致细胞交叉污染。
4、血清：有些血清在生产时就已经被支原体或病毒等污染，变成了污染。
5、组织样本：原代培养的污染多数来源于组织样本；取材时碘酒消毒后脱碘不彻底，三维细胞培养，可造成碘混入组织，细胞或培养液中，影响细胞细胞生长。
