试验操作留意事项 尽管扩增序列的残留污染大多数是假阳性反响的缘由，样品间的穿插污染也是缘由之一。因而，不只要在进行扩增反响是慎重认真，在样品的搜集、乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱抽提和扩增的一切环节都应当留意：
2. 运用一次性吸头，禁止与PCR产品剖析室的吸头混用，吸头不要长时刻露出于空气中，防止气溶胶的污染；
3. 防止反响液飞溅，翻开反响管时为防止此种情况，开盖前稍离心搜集液体于管底。若不当心溅到手套或桌面上，应马上更换手套并用稀酸擦洗桌面；
4. 操作多份样品时，制备反响混合液，乾芸PCR无菌操作台，先将dNTP、乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即能够削减操作，PCR无菌操作台，防止污染，又能够增加反响的精，确度；
5. 最终参加反响模板，参加后盖紧反响管；
6. 操作时建立阴阳性对照和空白对照，即可验证PCR反响的可靠性，PCR无菌操作台，又能够帮忙判别扩增体系的可信性；
7. 尽也许用可更换或可高压处理的加样器，因为加样器最简单受产品气溶胶或标本DNA的污染，最，佳运用可更换或高压处理的加样器。如没有这种特别的加样器，乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱至少PCR操作过程中加样器应当专用，PCR无菌操作台价格，不能穿插运用，尤其是PCR产品剖析所用加样器不能拿到其它两个区；
8. 重复试验，验证结果，慎下结论。
PCR实验中常见各种问题的原因解答集合
1 PCR产物的电泳检测时间
一般为48h以内，有些最，好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失；
2 假阴性，不出现扩增条带
PCR反应的关键环节有
①模板核酸的制备
②引物的质量与特异性
③酶的质量及
④PCR循环条件，寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。
模板：
①模板中含有杂蛋白质，
②模板中含有Taq酶抑制剂，
③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，
④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处 理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应 固定不宜随意更改。
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